🧬 专题:蛋白质纯化

蛋白质纯化是生物化学研究中的核心步骤,旨在从复杂混合物中分离出目标蛋白质,确保其活性与功能完整性。以下是关键要点:

1. 常用纯化技术

  • 层析法:利用分子大小、电荷或亲和力差异(如柱层析亲和层析)分离蛋白质
    柱层析
  • 电泳:通过电场驱动迁移(如SDS-PAGE等电聚焦
    SDS_PAGE
  • 超滤与透析:基于分子量筛选杂质
  • 沉淀法:使用盐析(如硫酸铵)或有机溶剂沉淀目标蛋白

2. 纯化流程关键点

  • 初步分离:细胞裂解 → 沉淀/离心
  • 精细纯化:层析柱操作 → 洗脱目标蛋白
  • 验证纯度:Western_Blot质谱分析
    Western_Blot

3. 应用领域

  • 药物开发:生产单克隆抗体等治疗性蛋白
  • 学术研究:酶活性分析、结构生物学
  • 工业生产:重组蛋白规模化制备

4. 注意事项

  • 保持低温防止蛋白变性
  • 选择合适的缓冲液(如Tris-HCl)
  • 避免过度离心导致活性损失

如需深入了解蛋白质纯化技术详解,可访问:/蛋白质纯化技术详解

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