蛋白质纯化是分子生物学实验中的关键步骤，以下是常用方法与操作指南：
📌 1. 基础原理
- 分离依据：利用蛋白质的物理化学性质差异（如大小、电荷、亲和性等）
- 核心目标：从复杂混合物中提取高纯度目标蛋白
- 常用工具：离心机（🪂）、层析柱（🧯）、电泳仪（⚡）
🧪 2. 主流技术流程
🧾 溶解与预处理
- 破碎细胞（如超声波处理）
- 调节pH值与离子强度
- 添加抑制剂（如PMSF）防止酶解
🧱 柱层析技术
- 离子交换层析
- 亲和层析
- 凝胶过滤层析
⚡ 电泳分离
- SDS-PAGE：根据分子量分离
- 等电聚焦：依据等电点纯化
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⚠️ 注意事项
- 操作前务必佩戴防护装备（手套、护目镜）
- 样品保存需遵循4℃冷藏或液氮冷冻原则
- 实验废液应按生物安全规范处理
如需特定技术（如His标签纯化、离子交换树脂选择），可进一步提问 😊