寡核苷酸合成教程 🧬

寡核苷酸（Oligonucleotide）是生物医学研究和应用中的重要工具，广泛用于基因编辑、药物研发、分子诊断等领域。以下为合成教程的核心内容：

合成原理简述

1. 化学合成法：通过固相合成技术（如 phosphoramidite 方法）逐个添加核苷酸基团
2. 酶促合成法：利用 DNA 聚合酶在模板引导下合成特定序列
3. 合成流程：脱保护 → 偶联 → 缩合 → 裂解 → 纯化

应用领域

• 基因功能研究：作为探针用于 PCR、Northern Blot 等实验
• 基因治疗：反义寡核苷酸（ASO）调节异常基因表达
• 疫苗开发：mRNA 疫苗中的核苷酸修饰技术
• 癌症诊断：用于检测突变位点的锁核酸（LNA）探针

操作指南

1. 选择合适的合成平台（如 BioBasic、Integrated DNA Technologies）
2. 设计序列时注意避免二级结构形成（使用 RNAfold 工具预测）
3. 合成后通过高效液相色谱（HPLC）纯化
4. 最终产物需进行质谱（Mass Spectrometry）鉴定

需要更详细的合成参数设置？可参考 [/寡核苷酸合成参数优化指南] 了解高级技巧

注意事项

• 合成长度通常在 15-100 个碱基范围内
• 磷酸二酯键易被核酸酶降解，需严格无菌操作
• 序列设计应遵循 5'→3' 方向原则

如需了解合成技术在 CRISPR-Cas9 中的具体应用，可访问 [/基因编辑技术应用] 获取更多案例分析。